Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Выполняют испытания в условиях, позволяющих избежать случайной контаминации испытуемого продукта. Меры предосторожности, предпринимаемые для предотвращения контаминации, не должны влиять ни на один из микроорганизмов, обнаруживаемых в ходе испытания. Если испытуемый продукт обладает антимикробной активностью, она должна быть подходящим образом нейтрализована. Если для этой цели используют инактиваторы, должна быть продемонстрирована их эффективность и нетоксичность в отношении микроорганизмов.
# Если всвязи с природой лекарственного средства нельзя использовать метод мембранной фильтрации, а все вышеперечисленные методы устранения его антимикробного действия в отношении данного тест-штамма не эффективны, этот вид испытания не проводят.
Суммарное количество жизнеспособных аэробов определяют методом мембранной фильтрации, чашечным методом подсчета или методом последовательных разведений, в соответствии с указаниями в частной статье.
# Допускается использование автоматизированных методов испытаний.
Метод наиболее вероятного числа предназначен для использования в тех случаях, когда другие методы использовать невозможно. При выборе метода испытания необходимо учитывать природу испытуемого лекарственного средства и ожидаемое количество микроорганизмов. Необходимо надлежащим образом провести проверку пригодности выбранной методики.
Если испытание проводится в соответствии с разделом 5.1.3 или 5.1.4, следует использовать методы глубинного, поверхностного, двухслойного высева на чашки Петри или метод мембранной фильтрации.
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦА
Порядок отбора проб. Отбор проб лекарственного средства необходимо проводить в строго определенном порядке. Порядок отбора проб зависит от объ-
ема серии, степени опасности для здоровья, связанной с микробным загрязнением лекарственного средства выше допустимого уровня, характеристиками лекарственного средства и ожидаемым уровнем микробного загрязнения. Если нет других указаний в частной статье, для испытания используют образцы по 10 г или 10 мл субстанции или лекарственного средства, отобранные с вышеупомянутыми мерами предосторожности. Образец (образцы) отбирают случайным образом из массы испытуемого материала или из контейнеров с лекарственным средством. Для отбора средней пробы, при необходимости, смешивают содержимое достаточного количества контейнеров для получения образца необходимой массы или объема, в зависимости от природы испытуемой субстанции или препарата.
Примером плана отбора проб является трехуровневый порядок пробоотбо-ра, используемый для лекарственных средств с большой вероятностью неравномерного распределения микроорганизмов. Этот план предусматривает отбор от каждой серии пяти образцов, каждый из которых испытывают отдельно. При этом допускают, что в результате исследования могут быть выявлены образцы, характеризующиеся тремя уровнями микробного загрязнения: (i) - соответствующие образцы, содержащие меньше m колониеобразующих единиц (КОЕ) в грамме или миллилитре, где m - предельно допустимое количество микроорганизмов, установленное соответствующей частной статьей; (ii) - граничные образцы, содержащие в грамме или миллилитре больше m, но меньше 10m КОЕ; (iii) - бракованные образцы, содержащие больше 10m КОЕ в грамме или миллилитре.
Водорастворимые продукты. 10 г или 10 мл испытуемого продукта растворяют в буферизированном растворе хлорида натрия и пептона рН 7,0 или другой подходящей жидкости. Обычно готовят разведение в соотношении 1:10. Однако характеристики некоторых продуктов или требуемая чувствительность могут обусловить необходимость использования других соотношений. Если известно, что продукт обладает антимикробной активностью, к растворителю может быть добавлен инактивирующий агент. При необходимости доводят значение рН приблизительно до 7 и готовят серийные десятикратные разведения с использованием того же растворителя.
Нерастворимые в воде продукты, не относящиеся к жирам. 10 г или 10
мл испытуемого продукта суспендируют в буферизированом растворе хлорида натрия и пептона рН 7,0 или в другой подходящей жидкости. Обычно готовят разведение в соотношении 1:10, но характеристики некоторых продуктов могут обусловить необходимость использования больших объемов. Для облегчения суспендирования плохо смачиваемых субстанций может быть добавлен подходящий поверхностно-активный компонент, например, полисорбат 80 в количестве 1 г/л. Если известно, что продукт обладает антимикробной активностью, к растворителю может быть добавлен инактивирующий агент. При необходимости доводят значение рН приблизительно до 7 и готовят серийные десятикратные разведения с использованием того же растворителя.
Жиры. 10 г или 10 мл испытуемого продукта гомогенизируют с полисорба-том 80 или с другим подходящим стерильным поверхностно-активным агентом, взятым в количестве, не превышающем половины массы испытуемого образца, и при необходимости нагретым до температуры, не превышающей 400С, в исключительных случаях - 450С. Осторожно перемешивают, при необходимости поддерживая температуру с помощью водяной бани или инкубатора. Добавляют предварительно нагретый буферизированный раствор хлорида натрия и пептона рН 7,0 в количестве, достаточном для получения разведения исходного продукта в соотношении 1:10. Осторожно перемешивают, поддерживая температуру в течение минимального промежутка времени, необходимого для образования эмульсии, и в
